Analiza w skali ogólnoustrojowej i CXCL4 jako biomarker w leczeniu stwardnienia rozsianego AD 3

Charakterystyka choroby 779 pacjentów ze stwardnieniem rozsianym. Do badań ekspresji CXCL4 w komórkach dendrytycznych plazmacytoidów, skrawki skóry uzyskano od 3 pacjentów z wczesnym rozsianym rozsianym twardziną układową z Uniwersytetu Bostońskiego i 6 pacjentów z późną rozproszoną chorobą z Uniwersytetu w Dusseldorfie w Niemczech. Wszyscy pacjenci spełnili wstępne kryteria American College of Rheumatology w celu klasyfikacji twardziny układowej (Tabela 1) .16 Fenotyp kliniczny pacjentów jest opisany w Dodatku Uzupełniającym, dostępnym wraz z pełnym tekstem tego artykułu na stronie. Wszystkie próbki otrzymano po tym, jak pacjenci otrzymali pisemną zgodę i po zatwierdzeniu badania przez instytucyjną komisję odwoławczą w każdym ośrodku uczestniczącym. Aby porównać poziomy CXCL4 w próbkach pobranych od pacjentów z twardziną układową z poziomami w próbkach pobranych od zdrowych dawców, uzyskaliśmy próbki osocza od 257 osób zdrowych i dobranych pod względem wieku z badania biomedycznego Nijmegen.17 Aby porównać poziomy CXCL4 u pacjentów z twardziną układową z poziomami u pacjentów z innymi stanami klinicznymi, określiliśmy poziomy CXCL4 w przechowywanych próbkach od 109 pacjentów z toczniem rumieniowatym układowym, którzy spełniali kryteria American College of Rheumatology18,19 (tabela S1 w dodatkowym dodatku), od 93 pacjentów ze zesztywniającym zapaleniem stawów kręgosłupa20 (Tabela S2 w Dodatku Uzupełniającym) oraz od pacjentów z różnymi stadiami zwłóknienia wątroby (szczegóły w Dodatku Uzupełniającym).
Badania komórkowe i pomiary mediatorów zapalnych
Wszystkie techniki użyte w tym badaniu zostały szczegółowo opisane w dodatkowym dodatku. Pokrótce, przeprowadziliśmy analizę supernatantu w całych proteomeach z komórek dendrytycznych plazmacytoidów, przy użyciu ulepszonej powierzchniowo spektrometrii masowej desorpcji / jonizacji czasu z lotem lasera (SELDI-TOF). Oznaczenie ilościowe wydzielanych cytokin przeprowadzono za pomocą testu immunoenzymatycznego związanego z enzymem lub testu immunologicznego Luminex. Użyliśmy pierwotnych komórek śródbłonka i obwodowych komórek dendrytycznych plazmacytoidów do zbadania działania CXCL4 in vitro. Aby ocenić funkcję CXCL4 in vivo, myszy C57BL / 6 eksponowano na podskórną CXCL4 w celu dalszej analizy RNA i histologicznej.
Analiza statystyczna
Użyliśmy testu t Studenta lub testu U Manna-Whitneya do analizy cech ilościowych, odpowiednio, oraz metody Kaplana-Meiera do oszacowania przeżycia u pacjentów z wysokim poziomem CXCL4 w punkcie wyjściowym, w porównaniu do tych z niskim poziomem CXCL4, z czasem przeżycia ustalonym na 24 miesiące. Po sprawdzeniu, że proporcjonalność zagrożeń nie została naruszona, wykorzystaliśmy analizę regresji Coxa do oszacowania wielkości efektu klasyfikacji CXCL4 na podstawie poziomów w osoczu w czasie do zdarzenia; Wyniki przedstawiono jako wskaźniki ryzyka wraz z ich asymptotycznymi 95% przedziałami ufności
[hasła pokrewne: Fordanserki, logopeda, wyposażenie stajni ]

Powiązane tematy z artykułem: Fordanserki logopeda wyposażenie stajni